2分钟前 进口程序降温仪器值得信赖 倍玛特仪器技术支持[倍玛特dd5d0d2]内容:研究新型无液氮降温仪与传统液氮降温仪在精1子冷冻保存方面的成本分析,结果显示点成的CRF-1免液氮程序降温仪的运行成本仅为传统液氮降温仪的1%。Willem博士等人在英国伦敦医学院采用点成的CRF-1免液氮程序降温仪,冷冻保存肝细胞(HepG2)球体(ELS),冷却速度为1°C / min,冷冻后,用37摄氏度温水复苏,成活率为97.8±0.5。远高于传统的液氮程序降温仪。产品亮点控制冷却速率和样品温度,重现性好使用方便简单,样品可原位成核/播种可实现线性和非线性降温方案运行成本低:约为液氮降温仪的1%对于细管应用,在循环完成时温度始终保持在零下100℃,直至关机可选择配置不间断电源(UPS),即使在断电的情况,通过UPS也能完成循环CE证书认证原厂认证授权的服务和校准3年。慢速降温保存通常采用“两步法”,即步先将生物样品采用某个较慢的降温速率降温到 -80℃并维持一段时间,然后第二步再将己经处于 -80℃状态的生物样品直接投入液氮罐里( -196℃)进行深低温的长期保存。慢速降温法的实质是使用较慢的降温速率,使得降温过程中细胞内的水逐渐脱离细胞,以达到减少细胞内冰晶形成的概率的目的,从而提高细胞的存活率。他的优势是所用的冷冻保护剂浓度较低,只需要3%-20%左右,但容易造成冷损伤和渗透压失衡。
步骤:(1)冷冻前24-48小时更换半量或全量培养基,使细胞处于指数生长期。(2)配制冷冻保存溶液(使用前配制):另取一离心管,加入培养基、,逐滴加入二亚砜 (DMSO)至20%浓度,即制成双倍的冻存液,置于室温下待用。(3)离心收集培养之细胞,用加的培养基重悬起细胞,取少量细胞悬浮液(约0. 1 ml)计数细胞浓度及冻前存活率。(4)取与细胞悬液等量的冻存液,缓慢逐滴加入细胞悬液,并晃动试管,制成细胞冻存悬液(DMSOzui后浓度为5~10%),使细胞浓度为1~5×106cells/ ml,混合均匀,分装于已标示完全之冷冻保存管中,1~2 ml/vial,并取少量细胞悬浮液作污染检测。严密封口后,注明细胞名称、代数、日期。然后进行冻存。